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　　蓝白斑筛选步骤 蓝白斑筛选是一种用于鉴定 DNA 重组子的方法，其基础是细菌在含有 X-Gal 和IPTG 的培养基上，会形成蓝色菌落。然而，当外源 DNA 片段插入到载体 DNA 中并整合到染色体 DNA 上时，会形成白斑。因此，蓝白斑筛选可用于筛选不含外源 DNA片段的重组子。以下是蓝白斑筛选的一般步骤： 1. 准备材料：需要准备以下物品和试剂： o 含有重组质粒的细菌培养物 o 含有 X-Gal 和 IPTG 的固体或半固体培养基 o 普通 LB 固体培养基 o 100g/ml Amp（如果需要筛选含 Amp 的阳性克隆） o 适量的无菌水 o 涂布器或棉签 o 培养皿或平皿 o 热板或恒温摇床 2. 制备平板：根据实验需求，将 X-Gal 和 IPTG 添加到 LB 固体或半固体培养基中，使其均匀混合。如果需要筛选含 Amp 的阳性克隆，将 Amp 加入培养基中。 3. 接种和培养： a. 从含有重组质粒的细菌培养物中取少量细菌，使用涂布器或棉签将其均匀涂布在含有 X-Gal 和 IPTG 的培养基上。 b. 如果需要筛选含 Amp 的阳性克隆，将细菌涂布在含有 Amp 的培养基上。