400-123-4567

　　T细胞治疗已显示出治疗复发性或高危肿瘤的治疗潜力。目前有两种方法用于对患者T细胞进行基因改造以识别肿瘤抗原，包括嵌合抗原受体(CARs)和亲和力成熟的TCRs。但是CARs仅限于靶向细胞表面上的表位，许多肿瘤特异性抗原是细胞内的，因此无法使用 CAR-T 方法进行靶向。基于TCR的疗法不仅能够识别细胞表面蛋白，还可以识别内部细胞蛋白。然而，TCR 疗法成功的一个障碍是天然 T 细胞受体对大多数肿瘤抗原的亲和力低。带有强烈识别自身抗原的 TCR 的 T 细胞在胸腺成熟过程中被负向选择。由于许多肿瘤抗原来源于自身蛋白，成熟的循环 T 细胞无法以高亲和力识别这些抗原。通过基因工程生成高亲和力TCR 有助于克服这些障碍。带有亲和力增强的 TCR-T 细胞与天然 TCR 相比已证明在体外提高了肿瘤细胞识别和杀伤能力。此外，具有亲和力增强的肿瘤特异性 TCR-T 细胞已显示出临床疗效。

　　黑色素瘤相关抗原 A4 (MAGE-A4) 是癌症/睾丸抗原 MAGE 蛋白家族的成员，在健康组织中的表达仅限于睾丸、胎儿卵巢和胎盘的生殖细胞。MAGE-A4 在多种实体癌中表达，包括滑膜肉瘤 (SS)、粘液样/圆形细胞脂肪肉瘤 (MRCLS)、非小细胞肺癌 (NSCLC)、头颈鳞状细胞癌 (HNSCC) 和卵巢癌、尿路上皮癌、 黑色素瘤和胃食管癌，因此成为肿瘤疫苗开发与免疫细胞治疗的理想靶点。

　　MAGE-A4 在细胞内加工，产生与细胞表面HLA共呈递的肽片段，形成被低亲和力天然TCR弱识别的表位。尽管免疫检查点抑制剂在某些 MAGE-A4+ 实体瘤（例如黑色素瘤）患者中表现出良好的临床活性，但其他肿瘤（例如滑膜肉瘤SS）反应不佳。

　　SS是一种罕见的恶性程度较高的软组织肉瘤，约占软组织肉瘤的8%。生长相对较缓慢，好发于青少年和30岁以下的成年人，偶见于儿童。发病率约为每百万人2.75例。SS常发生于肢体的深部软组织内，如膝关节、踝关节、肩部、腕部等部位，也可发生于与关节无关的部位如头颈部、胸部，腹膜、腹膜后等，虽然这种肿瘤被称为滑膜肉瘤，但是它并不起源于滑膜组织，确切发病机制目前并不明确。SS有效治疗手段较少，预后较差。目前的一线治疗方案为化疗药，临床上针对滑膜肉瘤的化疗方案能够提升患者的生存期，但效果有限。而其他的治疗方案如抗体、抑制剂效果则更为局限。

　　afami-cel疗法中MAGE-A4肽亲和力增强的TCR是从健康供体中分离的 TCR 经过亲和力优化生成。亲和力优化的方法在ADAP已发表的文献中有介绍[1，2]，大体流程是从 HLA-A*0201 阳性健康供体中分离的外周血单核细胞，使用 MAGE-A4230-239 自体抗原呈递细胞刺激T细胞数次， 然后通过 IFN-γ ELISpot 筛选这些 T 细胞的特异性激活，并分选特定克隆以供进一步培养。通过 cDNA 末端快速扩增 (RACE) 从 T 细胞 cDNA 中分离出 TCR α 和 β 链可变域，并选出用于PCR突变的模板,通过修改CDRs增强TCR对肽-HLA复合物的亲和力。

　　具有亲和力增强的TCR-T细胞能提高对抗原的识别，然而，这种增强可能会增加 TCR 对正常组织表达的其他抗原的产生交叉反应，并可能导致临床毒性。为了降低此类不良临床结果的风险，ADAP制定了广泛的临床前测试策略[1，2]，包括使用 2D 和 3D 人类细胞培养物和原发性肿瘤材料进行测试，以及使用人类原代细胞和细胞系交叉反应筛选和分子分析以预测亲和力增强的TCR-T细胞疗法的安全性和有效性（图3 ）。

　　通过这些临床前测试，选出了最终用于afami-cel中亲和力增强的TCR，并证实其特异性识别 HLA-A2 限制性 MAGE-A4 肽 GVYDGREHTV，在不存在针对一系列人类原代细胞和细胞系的主要脱靶交叉反应的情况下表现出有效的抗肿瘤活性。这些研究表明，这种 TCR 非常有效且没有重大安全问题。

　　1.afami-cel Phase 1 clinical trial(NCT03132922)ADAP对表达 MAGE-A4 的复发/难治性转移性实体瘤患者（包含9种肿瘤类型）进行了一项多中心、剂量递增的临床1期试验。主要终点是安全性，次要疗效终点包括总反应率（ORR）和反应持续时间。今年1月份ADAP在《自然·医学》期刊上报道部分试验数据[3]。所有接受afami-cel治疗的患者（N = 38，9种肿瘤类型）都经历了 ≥ 3 级血液学毒性；55% 的患者（90% ≤ 2 级）经历了细胞因子释放综合征。ORR(all partial response)为 24% (9/38)，其中SS患者反应率最高为 7/16 (44%)， 2/22 (9%)为其他癌症。9种肿瘤类型和 SS 的中位缓解持续时间分别为 25.6 周和28.1 周。分析表明，afami-cel 可浸润肿瘤，具有干扰素-γ 驱动的作用机制并触发适应性免疫反应。此外，afami-cel 具有可接受的收益风险特征，具有早期和持久的反应，尤其是在转移性 SS 患者中。

　　2.SPEARHEAD-1 （NCT04044768）这是一项 2 期、开放标签、单臂临床试验，评估 afami-cel 在 HLA-A*02 阳性且无法手术的表达 MAGE-A4 的晚期滑膜肉瘤（SS)或粘液样/圆形细胞脂肪肉瘤 (MRCLS)患者中的疗效。Cohort 1 的报名现已结束，Cohort 2 的报名仍在进行中。ADAP于2022结缔组织肿瘤学会(CTOS)年会上公布了SPEARHEAD-1中Cohort 1的分析数据[4]。数据截至2022年8月29日，在可评估的52例(44例SS，8例MRCLS）接受afami-cel治疗的患者中，ORR为36.5%（其中SS为38.6%，MRCLS为25.0%），疾病控制率为88.4%。SS的中位缓解持续时间为50.3周，MRCLS的中位缓解持续时间为18.2周。安全性整体可控，不良反应主要为低级别细胞因子释放综合征和可耐受/可逆的血液毒性。

　　ADAP在去年年底启动了关于afami-cel的BLA申请，用于治疗晚期滑膜肉瘤。afami-cel预计将于2023年中完成上市申请，有望成为首款针对实体瘤的TCR-T细胞疗法，为实体瘤患者带来了新的希望。

　　ADP-A2M4CD8是ADAP推出的下一代SPEAR-T细胞，使用afami-cel同样的工程化T细胞受体，但有两点不同。一是ADP-A2M4CD8在afami-cel的基础上加了CD8α同源二聚体；二是指征不同，afami-cel指征MAGE-A4阳性的肉瘤，ADP-A2M4CD8指征MAGE-4阳性率较高的其他实体瘤如肺癌、头颈癌、胃食管癌和膀胱癌。

　　据2022年11月8日公布的最新数据显示，ADP-A2M4CD8治疗的客观缓解率37%，较ESMO大会报告的33%有所上升，经过单剂ADP-A2M4CD8治疗后，晚期卵巢癌、尿路上皮癌和头颈癌患者中的ORR已上升至52%（ESMO大会上报告的ORR为44%）。与afami-cel临床数据相比较，ADP-A2M4CD8 T细胞治疗方案的抗肿瘤活性更强。